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PrimeScript RT reagent Kit with gDNA Eraser (Perfect Real Time) |
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cDNA合成效率的比较 |
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[方法] |
使用梯度稀释的Total RNA作为模板,使用本制品 (Code No. RR047A)、T公司同类型制品以及PrimeScript RT Master Mix (Perfect Real Time) (Code No. RR036A),分别按照各自制品推荐的条件进行反转录反应、qPCR反应,将结果进行比较。 |
模板: |
HL60细胞来源的Total RNA |
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(0,1 pg,10 pg,100 pg,1 ng,10 ng,100 ng,1 μg) |
qPCR: |
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820A) |
qPCR的模板: |
反转录反应液各2 μl |
目的基因: |
RPLP1 |
Primer: |
利用Perfect Real Time系统设计 |
qPCR装置: |
Thermal Cycler Dice Real Time System II (Code No. TP900) |
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[结果] |
RR047A的cDNA合成效率与不进行基因组DNA去除的RR036A的效率相当,比T公司同类型制品的cDNA合成效率高。另外,RR047A比T公司制品反应时间短。 |
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RR047 |
T公司同类制品 |
DNA去除反应 |
42℃ 2分钟 |
37℃ 5分钟 |
反转录反应 |
37℃ 15分钟 |
37℃ 15分钟
50℃ 5分钟 |
85℃ 5秒 |
98℃ 5分钟 |
反应时间 |
约17分钟 |
约30分钟 |
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本公司比较结果。 |
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