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易形成二级结构DNA片段的扩增例
 
同GC rich DNA片段相同，易形成二级结构的模板使用以往的Taq酶也难以进行PCR扩增。
 
下面是以易形成二级结构的DNA片段为模板，扩增片段大小为2.7kb的扩增例。
从图1可以看出，使用以往的Taq酶有非特异性扩增产物，而使用TaKaRa LA Taq （LA PCR Buffer II）可进行良好的扩增。
没有PCR扩增产物时，一般需进行PCR条件研讨及重新设计引物等，而使用高扩增效率的TaKaRa LA Taq （LA PCR Buffer II）即可改善PCR扩增反应。
强烈建议使用本酶。
 
Template：
 易形成二级结构的cDNA
(用EcoR I酶切后插入到pBluescript II的cDNA)
扩增片段大?。?br /> 约2.7 kb
Primer*：
 Custom long primer (30～32 mer)
(各10 pmol/50 μlPCR) 引物序列与GC rich DNA 片段的扩增例实验使用的引物相同
dNTP Mixture：
 以7-deaza-dGTP替代dGTP
PCR条件：
 94℃ 1 min
    ↓
  98℃ 20 sec.   30 cycles
  68℃ 3 min.  
(使用TaKaRa PCR Thermal Cycler 480)
 
DNA样品由庆应大学?分子生物学讲座的高柳先生提供