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不同大?。?.0-12.3 kb)的mRNA合成(有或无CleanCap)

 
实验方法:以不同大小的DNA为模板,使用PrimeCap T7 RNA Polymerase (low dsRNA)(Code No. 2560A)或T7 RNA Polymerase ver. 2.0(Code No. 2541A)在有或无4 mM CleanCap Reagent AG(TriLink)的情况下进行IVT反应,并将合成的mRNA(200 ng)热处理后进行电泳检测。
 
 
【左侧泳道】:2541A
【右侧泳道】:2560A
Marker:0.5-10 kb ssRNA Ladder Marker(Code No. 3417A)
 
结果显示,无论有无CleanCap Reagent AG,两种酶的电泳结果都没有明显差异,可以合成1.0-12.3 kb范围内的mRNA。
然后,检测合成mRNA的产量以及IVT反应时生成的dsRNA产量。
 
 
结果显示,使用2560A时,尽管mRNA产量与2541A相当,但可以大幅抑制dsRNA的生成。