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不同反应时间下蛋白质的表达
 
 
·向Human Cell-Free Protein Expression Master Mix for mRNA无细胞表达系统中，分别添加3种蛋白质对应的加帽mRNA*和非加帽mRNA。对应表达三种蛋白质：elF4G，FLuc和ZsGreen。（elF4G: 170 kDa, FLuc: 61 kDa, ZsGreen: 26 kDa）
·mRNA加量为2 μg
·32℃温育1、2、3和5小时
结果显示，只在加帽mRNA时确认了目标蛋白质的高表达。eIF4G表达3～5小时，FLuc表达2小时，ZsGreen表达5小时，蛋白质的表达量最高。这表明，在3288无细胞表达系统中，最佳反应时间因蛋白质不同而不同。
 
*：mRNA合成使用的试剂为：Cloning Kit for mRNA Template (BspQ I) (Code No. 6133)，Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit (Code No. 6144)，TriLink公司帽类似物CleanCap Reagent AG (3’OMe) 。