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■ 制品内容 |
Linearized Template Vector (BspQ I)(50 ng/μl) |
10 μl |
FLuc Control Fragment (BspQ I)(100 ng/μl) |
10 μl |
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■ 制品说明 |
Template Vector (BspQ I) for T7 mRNA Synthesis是用于使用TriLink公司的帽类似物[CleanCap Reagent AG或CleanCap Reactive AG(3’OMe)]构建体外转录 (IVT)mRNA的模板质粒。线性化的载体中包含T7启动子、转录起始序列(AGG)、5’-UTR(untranslated region)和3’-UTR、Poly(A)序列(141碱基),因此只需要对目标基因编码序列(coding sequence: CDS)进行In-Fusion无缝克隆,便可构建体外转录的模板质粒(图1、2)。随后用IIS型限制酶BspQ I消化,得到的线性化质粒模板用于合成Poly(A)尾无冗余序列的mRNA,获得的mRNA可用于人类、小鼠或其他哺乳动物细胞。使用线性化的模板质粒,通过Takara IVTpro T7 mRNA Synthesis Kit(Code No. 6144)进行体外转录(IVT),便可便捷地制备高产量的mRNA。
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■ 序列信息 |
序列信息以ZIP格式压缩,但也可以使用 StuffIt Expander进行解压缩。
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■ 【Vector Map】 |
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【详细信息请见链接】 |
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■ 注意事项 |
1. 构建模板质粒需要In-Fusion克隆试剂,可购买In-Fusion Snap Assembly Master Mix(Code No. 638947/48/49)。
2. 关于模板质粒的设计和使用,请结合本产品的说明书,以及Cloning Kit for mRNA Template (BspQ I)(Code No. 6143)的使用说明书。请确认您的目的基因CDS序列中不包含BspQ I位点。如果BspQ I位点存在于CDS中,为了不使氨基酸序列发生变化,请利用不同的密码子(例如:丙氨酸密码子的“GCU”到“GCC”等)变更DNA序列。
3. 如果制备的模板质粒中混入了RNA酶,则反应后获得的RNA的产量会降低或RNA会片段化。反应中使用的Tube和枪头必须是专用的,进行反应时请戴上一次性手套,注意不要混入RNA酶。
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